生殖中心胚胎实验室培养环境管理

　　生殖中心胚胎实验室环境的稳定直接关系到配子或胚胎体外操作的安全性，对于维持 IVF( in vitro fertilization）成功率具有重要作用。人类配子和胚胎对培养条件要求非常苛刻，在配子和胚胎发育的过程中，需遵循无菌、无毒、无误、无味、无尘的原则，持续保持实验室内温度22-24℃，相对湿度40%—60%，洁净程度高的房间要保持相对正压，为卵子受精和胚胎发育提供一个稳定的培养环境和有效的质量控制体系。那么，如何控制才能达到实验室环境的稳定，下面我给大家科普一下。

　　选址

　　IVF实验室的环境应该舒适、安全和没有噪音。因此确定IVF实验室的位置前需考虑周围的环境对其潜在的影响。从外部环境因素考虑IVF实验室应远离污染严重的工厂、建筑工地、加油站等场所；从院内环境因素考虑，应远离传染科、放射科、病理科、消毒室、洗涤室等。IVF实验室一般建议独立于院内其他科室，设置在相对独立、较高的楼层。

　　布局

　　IVF实验室空间的设计比较考究，大实验室一般由几个小室组成，分别为胚胎实验室、精液处理室、解冻室、冷冻室、缓冲间和耗材间等。其中胚胎实验室作为主操作室与手术室相邻，通过小窗或由实验室向手术室打开的单向门相通。采用层流过滤装置，使空气经初、中、高效三级过滤器，在动态条件下达到对细菌进行全过程控制，为实验室创造洁净舒适的环境。其中精液处理室、冷冻室、解冻室为万级净化，供胚胎开放操作的胚胎实验室为千级净化，操作胚胎的工作站局部达到百级净化。为保证洁净程度高的房间保持相对正压，不同等级洁净区间的压差应不小于5pa，洁净区与室外的压差应不小于10pa。IVF实验室人员进出洁净区应有固定的路线，进入之前，实验室人员必须先更换消毒后的手术衣、戴口罩和帽子、换实验室专用拖鞋、用外科洗手液按7步洗手法清洁双手后才能进入实验室，并禁止来回频繁走动或开启各房间门。

　　监测

　　每日上班前需进行实验室内温度、湿度及压力的监测并记录。检查所有仪器设备是否正常运行并记录，如工作站表面设定温度和实测温度、显微操作仪载物台热板表面设定温度和实测温度、恒温试管架设定温度和实测温度等，发现异常及时告知实验室主任，必要时通知工程师维修。开启培养室Coda Air空气过滤器。用CO2检测仪测量培养箱内CO2浓度，使其保持在6±0.2%的恒定范围内，并记录显示值与实测值，若相差0.2以上，复测一次，若仍异常，则及时校正。查看培养箱内温度，使其保持在37±0.5℃。工作结束在无人操作的情况下，关闭超净工作台、热板、电脑以及电灯电源，将桌面温度计放置在所有显微镜热板平面上缘及桌面培养箱中，再次查看各种培养箱是否正常运行，并开启远程报警系统等，最后在每日工作完成检查表中进行登记。

　　日常清洁

　　日清洁：每日用超纯水或IVF专用清洗液浸湿无菌纱布，擦拭超净工作站，桌面培养箱，COOK培养箱表面等，然后用干的无菌纱布擦干。使用稀释的IVF专用清洗液拖地。

　　周清洁：每周进行一次大清洁，范围包括墙面、超净工作站内部及外层高处、玻璃内外面、COOK培养箱表面及支架、箱式培养箱表面及支架、冰箱内外面、地面死角的毛发及玻璃等。每周更换COOK培养箱湿化瓶中纯水一次，用纯水浸湿无菌纱布擦拭培养箱内侧油迹，然后用干的无菌纱布擦掉水迹。 每周更换箱式培养箱水盘中纯水一次，并在培养箱质控登记本换水日期上用对勾表示。

　　月清洁：每月进行空气细菌培养。实验室各个角落均用IVF专用清洗液擦拭，在无人走动 30 分钟后，由专人做空气细菌培养。每 10 ㎡/琼脂皿，在无菌操作下打开 30 分钟，然后送细菌室培养化验。每月随机抽查培养室工作人员进行手卫生检查并记录结果。每月箱式培养箱需关掉气体，将可拆卸内部构架送消毒供应室消毒，用纯水擦拭培养箱内侧，待内部构架消毒回来后装入培养箱，打开气体，在培养箱质控登记本消毒日期上用对勾表示。次日晨测 CO2 浓度，看内部温度计温度，两者均正常后方可使用。

　　其他注意事项

　　①　实验室工作人员严禁化妆、喷香水，以及使用含有气味的其他用品。

　　②　箱式培养箱外过滤器更换周期为3个月，内过滤器为1年。COOK培养箱过滤器及湿化瓶更换周期为3个月。

　　③　Coda Air空气过滤器更换周期上半部分为1年，下半部分为6个月。

　　④　层流净化系统：每周用清水冲洗回风口，每3个月更换初效、每6个月更换中效、每1年更换高效。更换高效过滤器后检测室内尘埃数、风速、风量、温湿度等。

名医介绍：

李明明，女，中共党员，郑州大学第一附属医院生殖医学中心 副主任护师，医学硕士。长期从事不孕不育症胚胎实验室及人工授精区护理管理及科研工作。对胚胎实验室病历管理、培养皿的准备管理、电子芯片标签使用管理及胚胎冷冻信息编辑管理等方面有丰富的经验。目前主要从事工作为协助胚胎实验室技术人员进行精液处理、卵子处理及胚胎移植等各项操作。擅长对供精试管及供精人工授精的使用情况向各精子库进行反馈。发表国家级学术论文多篇，其中以第一作者发表论文5篇。